產(chǎn)品描述:腸激酶(Enterokinase, light chain),CAS號:9014-74-8,是一種高度專(zhuān)一性識別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶,在Lys的C端水解多肽。它可以將胰蛋白酶原轉變?yōu)橐让?,也可以將帶有這個(gè)識別序列的融合蛋白切開(kāi)。由于腸激酶具有高度專(zhuān)一性,水解效率高 的特點(diǎn),它被廣泛地應用于基因工程產(chǎn)品的開(kāi)發(fā),其應用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂,尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化 學(xué)、分子生物學(xué)等研究。
本產(chǎn)品為采用重組酵母分泌表達的高純度、高活性的牛腸激酶,適用范圍廣(4-45oC,pH4.5-9.5),并且在各種去垢劑和 變性劑存在的條件下仍具有部分活性。
腸激酶 英文名稱(chēng):Enterokinase;Enteropeptidase
腸激酶其它名稱(chēng):腸胨酶;腸蛋白酶;腸肽酶;腸激活酶;EK酶 右圖為腸道消化
級別:Recombinant
腸激酶活力定義:在37oC,16小時(shí)內將0.5毫克的Thioredoxin-NP-27 95%降解為NP-27所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位
性狀:滅菌液體、重組體
主要作用:用于生化研究。腸激酶是一種絲氨酸蛋白酶,它能高效專(zhuān)一性地水解工程菌表達的融合蛋白(識別順序是—(Asp)4Lys↓--)釋放出目的蛋白質(zhì)。由于腸激酶具有高度專(zhuān)一性,水解效率高的特點(diǎn),它被廣泛地應用于基因工程產(chǎn)品的開(kāi)發(fā);它能夠作為蛋白酶特異性地識別并切割含腸激酶切割位點(diǎn)的底物,其應用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂,尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。但天然腸激酶來(lái)源有限,并且從動(dòng)物組織提取的腸激酶污染有其他蛋白酶,這給實(shí)際應用帶來(lái)了困難。這就要求用基因工程方法生產(chǎn)高純度的腸激酶?;蚬こ谭椒ㄉa(chǎn)的高純度腸激酶活性與天然酶相似,但腸激酶切割速率更快。
保存環(huán)境:-20℃
腸激酶 化學(xué)試劑的種類(lèi)很多,世界各國對化學(xué)試劑的分類(lèi)和分級的標準不盡一致。
IUPAC對化學(xué)標準物質(zhì)的分類(lèi)為:
A級:原子量標準。
B級:和A 級最接近的基準物質(zhì)。
C級:含量為100+-0.02%的標準試劑
D級:含量為100+-0.05%的標準試劑
E級:以C級或D級為標準對比測定得到的純度的試劑
化學(xué)試劑按用途可分為標準試劑,一般試劑,生化試劑等等。我國習慣將相當于IUPAC 的C級、D級的試劑稱(chēng)為標準試劑。
常見(jiàn)影響重組腸激酶活性的因素:
>2M urea,>250mM NaCl,>20mM b-ME,>0.1% SDS,>50mM imidazole。
如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,為獲得理想的酶切結果,請先將樣品透析到1×反應緩沖液中,然后再進(jìn)行酶切實(shí)驗。
· 重組牛腸激酶酶切反應:
每個(gè)反應含有15μg的Thioredoxin-NP-27和不同數量的腸激酶。在37°C經(jīng)過(guò)16小時(shí)的反應后用15°C的SDS-PAGE膠檢測酶切效果。每個(gè)反應所含的酶量分別為:
Lane A: No rEK Lane B: 0.0008 units
Lane C: 0.0015 units Lane D: 0.003 units
Lane E: 0.008 units Lane F: 0.015 units Lane G: 0.03 units
重組牛腸激酶圖片
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